在液相色譜儀分析中常涉及到組分的保留值。保留值發生改變可使已建立的方法不能繼續進行下去，或引起分析周期太長，或者峰分不開。應該找出引起保留值變化的原因。

液相色譜分析中保留時間改變的原因

除上述條件之外，引起保留變化的原因主要包括下列3種：

1 柱-柱之間；

2 日-日或日內：保留時間可能隨時間而變化，如溫度、柱溫、pH值等對柱性能有影響，通常是所有的峰提前或延遲。

3 樣品-樣品間：偶爾也有樣品與標準品的保留時間不同，可能是樣品介質的影響。

以下重點討論造成日-日間和日內保留時間變化的影響因素，它們主要是：

a 分離條件控制差

除了色譜柱外，保留是溫度、流動相組成和流速的綜合體現，如果有一個條件變化，保留時間也會隨之發生變化。

b 柱平衡慢

流動相組成或溫度變化時，柱在新條件下再平衡需要一定的時間，在柱達到*平衡錢不應進樣。

c 柱鈍化

長時間進樣，柱會退化，強保留組分被柱不可逆的保留，導致所有組分保留減少。鍵合相層從填料微粒上剝落下來，會導致某些組分的保留增加，而另一組分的保留減少。

d 柱過載和樣品介質相互作用

過大的樣品量超出柱的線性范圍，使保留減少。也可能是樣品本身過載，從其它方面影響保留。